سانپ کے زہر میں کاربوکسائل ایسٹر بانڈ پر کام کرنے والے انزائمز

سانپ کے زہر میں انزائمز ہوتے ہیں جو کاربوکسائل ایسٹر بانڈز کو ہائیڈولائز کرتے ہیں۔ہائیڈولیسس کے ذیلی ذخائر فاسفولیپڈز، ایسٹیلکولین اور خوشبودار ایسیٹیٹ ہیں۔ان انزائمز میں تین قسمیں شامل ہیں: فاسفولیپیس، ایسٹیلکولینسٹیریز اور آرومیٹک ایسٹیریز۔سانپ کے زہر میں ارجنائن ایسٹیریز مصنوعی ارجینائن یا لائسین کو بھی ہائیڈولائز کر سکتا ہے، لیکن یہ بنیادی طور پر فطرت میں پروٹین پیپٹائڈ بانڈز کو ہائیڈولائز کرتا ہے، اس لیے اس کا تعلق پروٹیز سے ہے۔یہاں زیر بحث انزائمز صرف ایسٹر سبسٹریٹس پر کام کرتے ہیں اور کسی پیپٹائڈ بانڈ پر کام نہیں کرسکتے ہیں۔ان انزائمز میں، acetylcholinesterase اور phospholipase کے حیاتیاتی افعال زیادہ اہم ہیں اور ان کا مکمل مطالعہ کیا گیا ہے۔کچھ سانپ کے زہروں میں مضبوط خوشبودار ایسٹیریز سرگرمی ہوتی ہے، جو p-nitrophenyl ethyl ester، a – یا P-naphthalene acetate اور indole ethyl ester کو ہائیڈولائز کر سکتی ہے۔یہ ابھی تک معلوم نہیں ہے کہ آیا یہ سرگرمی کسی آزاد انزائم سے پیدا ہوتی ہے یا کاربوکسی لیسٹراز کے معروف ضمنی اثر سے، اس کی حیاتیاتی اہمیت کو چھوڑ دیں۔جب Agkistrodon halys Japonicus کے زہر کا رد عمل p-nitrophenyl ethyl ester اور indole ethyl ester کے ساتھ کیا گیا تو p-nitrophenol اور indole phenol کے hydrolysates نہیں ملے۔اس کے برعکس، اگر یہ ایسٹرز کوبرا زوشان ذیلی نسل کے سانپ کے زہر اور بنگارس ملٹی سنکٹس سانپ کے زہر کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں، تو وہ جلد ہی ہائیڈولائز ہو جائیں گے۔یہ معلوم ہے کہ کوبرا کے ان زہروں میں کولینسٹیریز کی مضبوط سرگرمی ہوتی ہے، جو مذکورہ ذیلی ذخائر کے ہائیڈولیسس کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے۔درحقیقت، Mclean et al.(1971) نے اطلاع دی ہے کہ کوبرا خاندان سے تعلق رکھنے والے بہت سے سانپ کے زہر انڈول ایتھائل ایسٹر، نیفتھلین ایتھائل ایسٹر اور بیوٹائل نیفتھلین ایسٹر کو ہائیڈولائز کرسکتے ہیں۔یہ سانپ کے زہر سے آتے ہیں: کوبرا، بلیک نیکڈ کوبرا، بلیک لپڈ کوبرا، گولڈن کوبرا، مصری کوبرا، کنگ کوبرا، گولڈن کوبرا مامبا، بلیک مامبا اور سفید ہونٹ والا مامبا

سانپ کا زہر میتھائل انڈول ایتھائل ایسٹر کو ہائیڈولائز کر سکتا ہے، جو سیرم میں کولینسٹیریز کی سرگرمی کا تعین کرنے کا سبسٹریٹ ہے، لیکن یہ سانپ کا زہر کولینسٹیریز کی سرگرمی نہیں دکھاتا ہے۔اس سے پتہ چلتا ہے کہ کوبرا زہر میں ایک نامعلوم ایسٹیریز موجود ہے، جو کولینسٹیریز سے مختلف ہے۔اس انزائم کی نوعیت کو سمجھنے کے لیے مزید علیحدگی کے کام کی ضرورت ہے۔

1، فاسفولیپیس A2

(I) جائزہ

فاسفولیپیس ایک انزائم ہے جو گلیسریل فاسفیٹ کو ہائیڈولائز کر سکتا ہے۔فطرت میں فاسفولیپیس کی 5 اقسام ہیں، یعنی فاسفولیپیس A2 اور فاسفولیپیس

A.، phospholipase B، phospholipase C اور phospholipase D. سانپ کا زہر بنیادی طور پر فاسفولیپیس A2 (PLA2) پر مشتمل ہوتا ہے، سانپ کے کچھ زہروں میں فاسفولیپیس B ہوتا ہے، اور دیگر فاسفولیپیسز بنیادی طور پر جانوروں کے بافتوں اور بیکٹیریا میں پائے جاتے ہیں۔تصویر 3-11-4 سبسٹریٹ ہائیڈولیسس پر ان فاسفولیپیسس کے ایکشن سائٹ کو دکھاتا ہے۔

فاسفولیپیسس میں، PLA2 کا زیادہ مطالعہ کیا گیا ہے۔یہ سانپ کے زہر میں سب سے زیادہ مطالعہ شدہ انزائم ہوسکتا ہے۔اس کا سبسٹریٹ Sn-3-glycerophosphate کی دوسری پوزیشن پر ایسٹر بانڈ ہے۔یہ انزائم بڑے پیمانے پر سانپ کے زہر، شہد کی مکھیوں کے زہر، بچھو کے زہر اور جانوروں کے بافتوں میں پایا جاتا ہے، اور PLA2 سانپ کے چار خاندانی زہروں میں وافر مقدار میں پایا جاتا ہے۔چونکہ یہ انزائم خون کے سرخ خلیات کو توڑتا ہے اور ہیمولیسس کا سبب بنتا ہے، اس لیے اسے "ہیمولیسن" بھی کہا جاتا ہے۔کچھ لوگ PLA2 کو ہیمولوٹک لیسیتھینیز بھی کہتے ہیں۔

Ludeeke نے سب سے پہلے پایا کہ سانپ کا زہر انزائمز کے ذریعے لیسیتین پر عمل کرکے ہیمولیٹک مرکب پیدا کرسکتا ہے۔بعد میں، Delezenne et al.ثابت ہوا کہ جب کوبرا کا زہر گھوڑے کے سیرم یا زردی پر کام کرتا ہے تو یہ ہیمولیٹک مادہ بناتا ہے۔اب یہ معلوم ہوا ہے کہ PLA2 براہ راست erythrocyte membrane کے phospholipids پر کام کر سکتا ہے، erythrocyte membrane کی ساخت کو تباہ کر سکتا ہے اور براہ راست hemolysis کا باعث بنتا ہے۔یہ ہیمولیٹک لیسیتھن پیدا کرنے کے لیے سیرم یا شامل لیسیتھن پر بھی عمل کر سکتا ہے، جو خون کے سرخ خلیات پر بالواسطہ ہیمولیسس پیدا کرنے کے لیے کام کرتا ہے۔اگرچہ سانپ کے زہر کے چار خاندانوں میں PLA2 وافر مقدار میں پایا جاتا ہے، لیکن مختلف سانپوں کے زہروں میں انزائمز کا مواد قدرے مختلف ہوتا ہے۔Rattlesnake (C

سانپ کے زہر نے صرف کمزور PLA2 سرگرمی دکھائی۔جدول 3-11-11 چین میں زہریلے سانپوں کے 10 بڑے زہروں کی PLA2 سرگرمی کے موازنہ کو واضح کرتا ہے۔

جدول 3-11-11 چین میں سانپ کے 10 زہروں کی فاسفولیپیس VIII کی سرگرمیوں کا موازنہ

سانپ کا زہر

چربی کی رہائی

الیفاٹک ایسڈ،

Cjumol/mg)

ہیمولیٹک سرگرمی CHU50/^ g * ملی لیٹر)

سانپ کا زہر

فیٹی ایسڈ جاری کریں۔

(^raol/mg)

ہیمولوٹک سرگرمی "(HU50/ftg * 1111)

نجانے آترا

9. 62

گیارہ

مائیکراسیفل اوفس

پانچ پوائنٹ ایک صفر

کیلیسپلاس

8. 68

دو ہزار آٹھ سو

gracilis

V، acutus

7. 56

* * #

اوفیو فیگس ہننا

تین پوائنٹ آٹھ دو

ایک سو چالیس

Bnugarus fasctatus

7,56

دو سو اسی

B. ملٹی سنکٹس

ایک پوائنٹ نو چھ

دو سو اسی

وائپر ایک رسیلی

سات پوائنٹ صفر تین

T، mucrosquamatus

ایک پوائنٹ آٹھ پانچ

سیامنسس

T. stejnegeri

0. 97

(2) علیحدگی اور تزکیہ

سانپ کے زہر میں PLA2 کا مواد بڑا ہوتا ہے، اور یہ گرم، تیزاب، الکلی اور ڈینیچرنٹ کے لیے مستحکم ہوتا ہے، تاکہ PLA2 کو صاف اور الگ کرنا آسان ہو۔عام طریقہ یہ ہے کہ پہلے خام زہر پر جیل فلٹریشن کی جائے، پھر آئن ایکسچینج کرومیٹوگرافی کی جائے، اور اگلا مرحلہ دہرایا جا سکتا ہے۔واضح رہے کہ آئن ایکسچینج کرومیٹوگرافی کے بعد PLA2 کو منجمد خشک کرنے سے جمع ہونے کا سبب نہیں بننا چاہیے، کیونکہ منجمد خشک کرنے کا عمل اکثر نظام میں آئنک طاقت کو بڑھاتا ہے، جو PLA2 کے جمع ہونے کا ایک اہم عنصر ہے۔مندرجہ بالا عام طریقوں کے علاوہ، درج ذیل طریقے بھی اپنائے گئے ہیں: ① Wells et al.② PLA2 کا سبسٹریٹ اینالاگ وابستگی کرومیٹوگرافی کے لیے بطور ligand استعمال کیا گیا تھا۔یہ لیگنڈ Ca2+ کے ساتھ سانپ کے زہر میں PLA2 سے جڑ سکتا ہے۔EDTA زیادہ تر eluent کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔Ca2+ کو ہٹانے کے بعد، PLA2 اور ligand کے درمیان تعلق کم ہو جاتا ہے، اور اسے ligand سے الگ کیا جا سکتا ہے۔دوسرے 30% نامیاتی محلول یا 6mol/L یوریا بطور ایلیونٹ استعمال کرتے ہیں۔③ ہائیڈرو فوبک کرومیٹوگرافی PheiiylSephar0SeCL-4B کے ساتھ کی گئی تاکہ کارڈیوٹوکسن میں PLA2 کا پتہ لگایا جا سکے۔④ اینٹی PLA2 اینٹی باڈی کو PLA2 پر وابستگی کرومیٹوگرافی انجام دینے کے لیے بطور ligand استعمال کیا گیا تھا۔

اب تک بڑی تعداد میں سانپ کے زہر PLAZ کو پاک کیا جا چکا ہے۔Tu et al.(1977) 1975 سے پہلے PLA2 کو سانپ کے زہر سے پاک کیا گیا تھا۔ حالیہ برسوں میں، PLA2 کی علیحدگی اور پاکیزگی کے بارے میں ہر سال بڑی تعداد میں مضامین رپورٹ ہوئے ہیں۔یہاں، ہم چینی علماء کے ذریعہ PLA کی علیحدگی اور تطہیر پر توجہ مرکوز کرتے ہیں۔

چن یوانکونگ وغیرہ۔(1981) نے Zhejiang میں Agkistrodon halys Pallas کے زہر سے تین PLA2 پرجاتیوں کو الگ کیا، جنہیں ان کے isoelectric points کے مطابق تیزابی، غیر جانبدار اور alkaline PLA2 میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔اس کی زہریلا کے مطابق، غیر جانبدار PLA2 زیادہ زہریلا ہے، جس کی شناخت presynaptic neurotoxin Agkistrodotoxin کے طور پر کی گئی ہے۔الکلائن PLA2 کم زہریلا ہے، اور تیزابی PLA2 میں تقریبا کوئی زہریلا نہیں ہے۔وو Xiangfu et al.(1984) نے تین PLA2s کی خصوصیات کا موازنہ کیا، جن میں مالیکیولر وزن، امینو ایسڈ کمپوزیشن، N-ٹرمینل، آئیسو الیکٹرک پوائنٹ، تھرمل استحکام، انزائم کی سرگرمی، زہریلا اور ہیمولٹک سرگرمی شامل ہیں۔نتائج سے معلوم ہوا کہ ان کا مالیکیولر وزن اور تھرمل استحکام ایک جیسا تھا، لیکن دوسرے پہلوؤں میں ان میں نمایاں فرق تھا۔انزائم سرگرمی کے پہلو میں، ایسڈ انزائم کی سرگرمی الکلائن انزائم سرگرمی سے زیادہ تھی۔چوہے کے سرخ خون کے خلیوں پر الکلائن انزائم کا ہیمولیٹک اثر سب سے زیادہ مضبوط تھا، اس کے بعد غیر جانبدار انزائم، اور تیزابی انزائم مشکل سے ہیمولائز ہوا۔لہذا، یہ قیاس کیا جاتا ہے کہ PLAZ کا ہیمولٹک اثر PLA2 مالیکیول کے چارج سے متعلق ہے۔Zhang Jingkang et al.(1981) نے Agkistrodotoxin کرسٹل بنائے ہیں۔Tu Guangliang et al.(1983) نے رپورٹ کیا کہ 7. 6 کے آئیسو الیکٹرک پوائنٹ کے ساتھ ایک زہریلا پی ایل اے کو فوزیان سے وائپرا روٹنڈس کے زہر سے الگ تھلگ اور پاک کیا گیا تھا، اور اس کی جسمانی اور کیمیائی خصوصیات، امینو ایسڈ کی ساخت اور این پر 22 امینو ایسڈ کی باقیات کی ترتیب۔ -ٹرمینل کا تعین کیا گیا تھا۔لی یوشینگ وغیرہ۔(1985) فوجیان میں وائپر روٹنڈس کے زہر سے ایک اور PLA2 کو الگ تھلگ اور پاک کیا۔PLA2 کا ذیلی یونٹ 13 800 ہے، isoelectric point 10.4 ہے، اور مخصوص سرگرمی ہے 35/xnioI/miri mg. سبسٹریٹ کے طور پر lecithin کے ساتھ، انزائم کا بہترین pH 8.0 ہے اور زیادہ سے زیادہ درجہ حرارت 65 ° C ہے۔ LD5 چوہوں میں نس کے ذریعے لگایا گیا۔یہ 0.5 ± 0.12mg/kg ہے۔اس انزائم کے واضح اینٹی کوگولنٹ اور ہیمولٹک اثرات ہیں۔زہریلا PLA2 مالیکیول 18 قسم کے امینو ایسڈ کی 123 باقیات پر مشتمل ہوتا ہے۔مالیکیول سیسٹین (14)، اسپارٹک ایسڈ (14) اور گلائسین (12) سے بھرپور ہے، لیکن اس میں صرف ایک میتھیونین ہوتا ہے، اور اس کا N-ٹرمینل سیرین ریزیڈیو ہے۔Tuguang کی طرف سے الگ تھلگ PLA2 کے مقابلے میں، سالماتی وزن اور دو isoenzymes کے امینو ایسڈ کی باقیات کی تعداد بہت ملتی جلتی ہے، اور امینو ایسڈ کی ساخت بھی بہت ملتی جلتی ہے، لیکن aspartic acid اور proline residues کی تعداد کچھ مختلف ہے۔گوانگسی کنگ کوبرا سانپ کے زہر میں بھرپور PLA2 ہوتا ہے۔شو یوان وغیرہ۔(1989) نے زہر سے ایک PLA2 کو الگ کیا، جس کی مخصوص سرگرمی اصل زہر سے 3.6 گنا زیادہ ہے، مالیکیولر وزن 13000، 122 امینو ایسڈ کی باقیات کی ترکیب، 8.9 کا ایک آئیسو الیکٹرک پوائنٹ، اور اچھی تھرمل استحکام ہے۔خون کے سرخ خلیوں پر بنیادی PLA2 کے اثر کے الیکٹران خوردبین کے مشاہدے سے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ اس کا انسانی خون کے سرخ خلیات پر واضح اثر ہوتا ہے، لیکن بکری کے خون کے سرخ خلیات پر اس کا کوئی واضح اثر نہیں ہوتا ہے۔یہ PLA2 انسانوں، بکریوں، خرگوشوں اور گنی پگ میں خون کے سرخ خلیات کی الیکٹروفوریٹک رفتار پر واضح رکاوٹ کا اثر رکھتا ہے۔چن وغیرہ۔یہ انزائم ADP، کولیجن اور سوڈیم arachidonic ایسڈ کے ذریعہ پلیٹلیٹ کے جمع ہونے کو روک سکتا ہے۔جب PLA2 کا ارتکاز 10/xg/ml~lOOjug/ml ہوتا ہے، تو پلیٹلیٹ کی جمع مکمل طور پر روک دی جاتی ہے۔اگر دھوئے ہوئے پلیٹلیٹس کو بطور مواد استعمال کیا جائے تو PLA2 20Mg/ml کے ارتکاز میں جمع ہونے کو نہیں روک سکتا۔اسپرین cyclooxygenase کی روک تھام کرنے والا ہے، جو پلیٹلیٹس پر PLA2 کے اثر کو روک سکتا ہے۔PLA2 تھروم باکسین A2 کی ترکیب کے لیے arachidonic ایسڈ کو ہائیڈولائز کر کے پلیٹلیٹ جمع کو روک سکتا ہے۔Zhejiang صوبے میں Agkistrodon halys Pallas venom کے ذریعہ تیار کردہ PLA2 کے حل کی تشکیل کا مطالعہ سرکلر ڈیکروزم، فلوروسینس اور UV جذب کے ذریعے کیا گیا۔تجرباتی نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ اس انزائم کی مرکزی زنجیر کی تشکیل دوسری نسلوں اور نسلوں کے اسی قسم کے انزائم سے ملتی جلتی تھی، کنکال کی تشکیل میں گرمی کی اچھی مزاحمت تھی، اور تیزابی ماحول میں ساختی تبدیلی الٹ سکتی تھی۔ایکٹیویٹر Ca2+ اور انزائم کا امتزاج ٹرپٹوفن کی باقیات کے ماحول کو متاثر نہیں کرتا ہے، جب کہ روکنے والا Zn2+ اس کے برعکس کرتا ہے۔جس طریقے سے محلول کی pH قدر انزائم کی سرگرمی کو متاثر کرتی ہے وہ مندرجہ بالا ریجنٹس سے مختلف ہے۔

سانپ کے زہر کے PLA2 کو صاف کرنے کے عمل میں، ایک واضح رجحان یہ ہے کہ سانپ کے زہر میں دو یا زیادہ PLA2 کے اخراج کی چوٹیاں ہوتی ہیں۔اس رجحان کی وضاحت اس طرح کی جا سکتی ہے: ① isozymes کے وجود کی وجہ سے؛② PLA2 کی ایک قسم کو مختلف مالیکیولر وزن کے ساتھ PLA2 مرکب کی ایک قسم میں پولیمرائز کیا جاتا ہے، جن میں سے زیادہ تر 9 000 ~ 40 000 کی حد میں ہوتے ہیں۔③ PLA2 اور سانپ کے زہر کے دیگر اجزاء کا مجموعہ PLA2 کو پیچیدہ بناتا ہے۔④ چونکہ PLA2 میں امائڈ بانڈ ہائیڈولائزڈ ہے، چارج بدل جاتا ہے۔① اور ② عام ہیں، صرف چند مستثنیات کے ساتھ، جیسے CrWa/w سانپ کے زہر میں PLA2

دو صورتیں ہیں: ① اور ②۔تیسری حالت PLA2 میں درج ذیل سانپوں کے زہر میں پائی گئی ہے: Oxyranus scutellatus، Parademansia microlepidota، Bothrops a ^>er، فلسطینی وائپر، سینڈ وائپر، اور خوفناک ریٹل سانپ کلومیٹر۔

کیس ④ کا نتیجہ الیکٹروفورسس کے دوران PLA2 کی منتقلی کی رفتار کو تبدیل کرتا ہے، لیکن امینو ایسڈ کی ساخت تبدیل نہیں ہوتی ہے۔پیپٹائڈس کو ہائیڈولیسس کے ذریعے توڑا جا سکتا ہے، لیکن عام طور پر وہ اب بھی ڈسلفائیڈ بانڈز کے ذریعے ایک دوسرے کے ساتھ جڑے ہوئے ہیں۔مشرقی پٹ ریٹل سانپ کے زہر میں PLA2 کی دو شکلیں ہیں، جنہیں بالترتیب ٹائپ اے اور ٹائپ پی پی ایل اے 2 کہا جاتا ہے۔PLA2 کی ان دو اقسام کے درمیان فرق صرف ایک امینو ایسڈ ہے، یعنی ایک PLA2 مالیکیول میں گلوٹامائن دوسرے PLA2 مالیکیول میں گلوٹامک ایسڈ سے بدل جاتا ہے۔اگرچہ اس فرق کی صحیح وجہ واضح نہیں ہے، لیکن عام طور پر یہ خیال کیا جاتا ہے کہ اس کا تعلق PLA2 کے deamination سے ہے۔اگر فلسطینی وائپر زہر میں PLA2 کو خام زہر کے ساتھ گرم رکھا جائے تو اس کے انزائم مالیکیولز میں آخری گروپ پہلے سے زیادہ ہو جائیں گے۔سانپ کے زہر سے الگ ہونے والے C PLA2 کے دو مختلف N-ٹرمینل ہیں، اور اس کا مالیکیولر وزن 30000 ہے۔ یہ رجحان PLA2 کے غیر متناسب ڈائمر کی وجہ سے ہو سکتا ہے، جو PLA2 کے ذریعہ مشرقی ڈائمنڈ بیک ریٹلسناکے کے زہر میں بنائے گئے ہم آہنگ ڈائمر سے ملتا جلتا ہے۔ اور ویسٹرن ڈائمنڈ بیک ریٹل سانپ۔ایشیائی کوبرا بہت سی ذیلی انواع پر مشتمل ہے، جن میں سے کچھ درجہ بندی میں زیادہ قطعی نہیں ہیں۔مثال کے طور پر، جسے کوبرا آؤٹر کیسپین کی ذیلی نسل کہا جاتا تھا اب تسلیم کیا گیا ہے۔

اسے بیرونی کیسپین سمندری کوبرا سے منسوب کیا جانا چاہئے۔چونکہ بہت سی ذیلی اقسام ہیں اور وہ آپس میں گھل مل جاتی ہیں، مختلف ذرائع کی وجہ سے سانپ کے زہر کی ساخت بہت مختلف ہوتی ہے، اور PLA2 isozymes کا مواد بھی زیادہ ہوتا ہے۔مثال کے طور پر، کوبرا زہر

r^ll پرجاتیوں کے کم از کم 9 قسم کے PLA2 isozymes پائے گئے، اور 7 قسم کے PLA2 isozymes کوبرا کی ذیلی نسل کیسپین کے زہر میں پائے گئے۔Durkin et al.(1981) نے PLA2 کے مواد اور مختلف سانپوں کے زہروں میں isozymes کی تعداد کا مطالعہ کیا، بشمول 18 کوبرا زہر، 3 مامبا زہر، 5 وائپر زہر، 16 rattlesnake venoms اور 3 سمندری سانپ کے زہر۔عام طور پر، کوبرا زہر کی PLA2 سرگرمی زیادہ ہوتی ہے، جس میں بہت سے isozymes ہوتے ہیں۔وائپر زہر کی PLA2 سرگرمی اور isozymes درمیانے درجے کے ہیں۔مامبا زہر اور ریٹلسنیک زہر کی PLA2 سرگرمی بہت کم ہے یا PLA2 سرگرمی نہیں ہے۔سمندری سانپ کے زہر کی PLA2 سرگرمی بھی کم ہے۔

حالیہ برسوں میں، یہ اطلاع نہیں دی گئی ہے کہ سانپ کے زہر میں PLA2 ایکٹیو ڈائمر کی شکل میں موجود ہے، جیسے کہ مشرقی rhombophora rattlesnake (C. سانپ کے زہر میں ٹائپ اے اور ٹائپ P PLA2 ہوتا ہے، یہ دونوں دو ایک جیسے ذیلی یونٹوں پر مشتمل ہوتے ہیں۔ ، اور صرف dimerase ہے

سرگرمیشین وغیرہ۔یہ بھی تجویز کیا کہ سانپ کے زہر کے PLA2 کا صرف ڈائمر ہی انزائم کی فعال شکل ہے۔مقامی ساخت کا مطالعہ یہ بھی ثابت کرتا ہے کہ ویسٹرن ڈائمنڈ بیک ریٹل اسنیک کا PLA2 ڈائمر کی شکل میں موجود ہے۔مچھلی خور مرکب

سانپ کے زہر کے دو مختلف PLA^Ei اور E2 ہیں، جن میں 仏 ڈائمر کی شکل میں موجود ہے، ڈائمر فعال ہے، اور اس کا منقطع مونومر غیر فعال ہے۔Lu Yinghua et al.(1980) نے مزید E. Jayanthi et al کی جسمانی اور کیمیائی خصوصیات اور رد عمل کینیٹکس کا مطالعہ کیا۔(1989) نے ایک بنیادی PLA2 (VRVPL-V) کو وائپر زہر سے الگ کیا۔مونومر PLA2 کا مالیکیولر وزن 10000 ہے، جس میں مہلک، اینٹی کوگولنٹ اور ورم کے اثرات ہوتے ہیں۔انزائم PH 4.8 کی حالت میں مختلف مالیکیولر وزن کے ساتھ پولیمر کو پولیمرائز کر سکتا ہے، اور پولیمرائزیشن کی ڈگری اور پولیمر کے سالماتی وزن میں درجہ حرارت کے اضافے کے ساتھ اضافہ ہوتا ہے۔96 ° C پر پیدا ہونے والے پولیمر کا مالیکیولر وزن 53 100 ہے، اور اس پولیمر کی PLA2 سرگرمی دو گنا بڑھ جاتی ہے۔